GFC是一种基于分子尺寸和形状不同来分离的技术，通常不需要梯度洗脱，对于大部分球形蛋白质而言，相同时间内进入GFC的分离柱，分子量越大则其在柱中的实际运行路径越短，流出柱所需的时间越短